CBL - Campus del Baix Llobregat

Projecte llegit

Títol: Efecte de Trichoderma sobre la supresivitat natural del sòl a Meloidogyne

Estudiant que ha llegit aquest projecte:

Tutor/a o Cotutor/a: SORRIBAS ROYO, FRANCISCO JAVIER

Departament: DEAB

Títol: Efecte de Trichoderma sobre la supresivitat natural del sòl a Meloidogyne

Data inici oferta: 20-12-2017      Data finalització oferta: 20-07-2018

Estudis d'assignació del projecte:

    Lloc de realització:
    EEABB

    Segon tutor/a (UPC): ESCUDERO BENITO, NURIA

    Paraules clau:
    Capacitat antagònica del sòl, Nematode de les agalles, Solanum lycopersicum,Trichoderma

    Descripció del contingut i pla d'activitats:
    Los ensayos se llevarán a cabo con dos suelos previamente caracterizados como supresivos a Meloidogyne por parte del equipo investigador. El suelo de cada finca se mezclará con arena estéril en proporción 1:1 (v:v) para evitar su compactación y favorecer el desarrollo de las raíces. Se tomará una muestra de la mezcla de cada suelo de forma estéril para los estudios moleculares. El análisis de estos suelos nos permitirá caracterizar la comunidad microbiana del mismo. Posteriormente, se extraerán los nematodos fitoparásitos a partir de cuatro muestras de 500 cm3 de suelo mediante el método de las bandejas de Whitehead.
    Cada mezcla de suelo se distribuirá en macetas de 3 L de capacidad. Las plantas de los cultivares de tomate resistente o susceptible serán trasplantadas cuando tengan la tercera hoja bien formada. Aquellas que se combinen con Trichoderma serán tratadas un día antes del trasplante, y posteriormente, según las instrucciones de la casa comercial. Las plantas serán inoculadas para alcanzar una densidad de población inicial de 2 J2 cm-3 de suelo justo después de trasplantar. El cultivo se desarrollará de abril a junio. Cada combinación suelo-tratamiento-cultivar de tomate se repetirá 10 veces.
    Al final del ensayo, los nematodos del suelo se extraerán a partir de dos submuestras de 250 cm3 de suelo mediante el método de centrifugación-flotación para estimar la densidad de población del nematodo en los 3 L de suelo (Pfs).
    Para caracterizar la actividad y densidad microbiana del suelo se llevaran a cabo pruebas bioquímicas (actividad enzimatica) y molculares (qPCR). De las raíces, se tomarán 5 masas de huevo y se procederá a determinar el porcentaje de parasitismo y las especies fúngicas implicadas mediante el método descrito en Giné et al (2016), y seguidamente se extraerán los huevos mediante la maceración en una solución de lejía comercial (43 g/L cloro activo) al 5% durante 10 min en una batidora (Hussey y Barker, 1973). Los huevos se concentrarán en un tamiz de 25 µm de luz de malla y se contabilizaran para calcular la población final de huevos potencialmente viables en toda la raíz, es decir, restando la proporción de huevos parasitados (Pfr). La población del nematodo al final del cultivo (Pf) será la suma de Pfs y Pfr, y se calculará la tasa de multiplicación de la población (Pf/Pi).

    Los ensayos se realizaran en el marco del grupo SGR Patología Vegetal des de febrero a junio de 2018

    Overview (resum en anglès): Nematodes of genus Meloidogyne spp. are vegetal parasites that distribute around the world and affect a wide range of species, which causes great economic losses on crops. There are suppressive soils to Meloidogyne spp., which means, soils where the nematodes are present and, in favourable conditions, the disease severity and the population development are minor than in other soils. Among different biotic and abiotic factors, soil microbiota is been associated as the main cause of suppressiveness, in which stand out nematophagous fungi.
    On these soils, the use of antagonist organisms to fight soil diseases produced by fungi may affect nematode suppressiveness. In this context, the aim of this work was to study the effect of Trichoderma asperellum T34, alone or combined with a Meloidogyne resistant cultivar on the supressiveness of one of these soils. To carry out this assay, half of the tomato plants (Solanum lycopersicum) resistant (cv. Monika) and susceptible (cv. Durinta) to Meloidogyne were treated twice with T34 at recommended commercial dose, the first time a week before transplanting, and the second one just after the transplant in 3 L pots which contained a 1:1 mixture (suppressive soil M10.55 : sterilized river sand). The other half of plants did not receive any treatment. All plants were inoculated with 1 second stage juvenile of Meloidogyne javanica per cm3 of substrate just after transplanting. Two months later, we determined the dry aerial weight (PSA), fresh radicular weight (PFR), the number of nematode eggs, the fungal parasitism of the eggs and the involved species. At the same time, we studied the in-vitro interaction between T. asperellum and Pochonia chlamydosporia, main responsible fungus of soil suppressiveness. In addition, we used molecular biology tools to indentify T. asperellum. The assay results showed a lower reproduction on resistant plants treated with T. asperellum T34 regarding on non-treated ones. The egg parasitism percentage oscillated between 20 and 30%, without varying between treated and non-treated plants. The main isolated fungus from eggs was P. chlamydosporia, while Trichoderma was only isolated from one parasited egg. The in-vitro interaction between those fungi did not demonstrate a prominent inhibition between them on 5 days of dual culture. By polymerase chain reaction (PCR), we determined that using primers tag83B, we could identify T. asperellum. They were also useful to identify the specie of Trichoderma present on the soil M10.55 as a component of fungal microbiota.
    Therefore, we consider that the commercial dose application of T. asperellum T34 does not affect the nematode suppressiveness of the soil and, in addition, it involves a reduction of reproduction on resistant tomato cultivar.

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